無外泌體血清|SBI說明書

產(chǎn)品名稱：去除無外泌體血清

貨號：EXO-FBS-50A-1

品牌：SBI

規(guī)格：50ml

當外泌體在1980年被發(fā)現(xiàn)后，其被認為是細胞排泄廢物的一種方式，如今隨著大量對其生物來源、其物質(zhì)構(gòu)成及運輸、細胞間信號的傳導(dǎo)以及在體液中的分布的研究發(fā)現(xiàn)外泌體具有多種多樣的功能。外泌體的功能取決于其所來源的細胞類型，其可參與到機體免疫應(yīng)答、抗原提呈、細胞遷移、細胞分化、腫瘤侵襲等方方面面。有研究表明腫瘤來源的外泌體參與到腫瘤細胞與基底細胞的遺傳信息的交換，從而導(dǎo)致大量新生血管的生成，促進了腫瘤的生長與侵襲。

外泌體大家應(yīng)該都很熟悉。1983年，在綿羊網(wǎng)織紅細胞中第一次發(fā)現(xiàn)了現(xiàn)在生物學(xué)研究領(lǐng)域炙手可熱的“小網(wǎng)紅"——一種特殊囊泡結(jié)構(gòu)，并與1987年正式被命名為“exosome"。

外泌體是指包含了復(fù)雜 RNA 和蛋白質(zhì)的小膜泡 (30-150nm)，現(xiàn)今，其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。為細胞間通訊的重要媒介，它像一個信使，為細胞與胞外環(huán)境傳遞信息，保障機體的正常工作。

越來越多的科研人員投入到外泌體的研究中，根據(jù)PubMed統(tǒng)計顯示，最近幾年，外泌體研究呈爆炸增長。

外泌體的研究離不開細胞培養(yǎng)。以腫瘤相關(guān)外泌體研究為例，目前，收集腫瘤細胞外泌體主要有兩種方法：

方法一

使用正常培液養(yǎng)細胞再換無血清培液收外泌體。

方法二

直接使用exosome-free FBS配制培養(yǎng)基用于培養(yǎng)細胞收外泌體。

首先，就是基本的離心條件了，目前超離比較好的就是貝克曼或者日立的了，這兩家超離在行業(yè)內(nèi)算是翹楚了。其次就是離心參數(shù)了：120000 g，4℃，離心14h，離心結(jié)果如圖：

1：離心后，血清外泌體會富集在管底和管壁；

2：吸取血清時，只吸取澄清部分的血清，并且遠離上圖中標記的區(qū)域；

3：吸取70-80%的澄清的血清；（注意：動作慢，動作輕）

4：其余的渾濁血清留作正常細胞的的營養(yǎng)物添加使用，避免浪費。

5：如果覺得純度不夠，再把離心后收集的血清做二次超速離心。

6：針對超速離心后的血清，必須進行粒徑檢測（離心前樣品和離心后樣品），該數(shù)據(jù)可以放到文章補充材料中，用來證明無血清外泌體制備成功。

WINSERA® Fetal Bovine Serum 胎牛血清目錄如下：

人膽囊上皮細胞永生化

人膽囊上皮細胞永生化+GFP

人前庭鞘膜瘤細胞永生化

人胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤細胞永生化

人胰腺癌細胞永生化

人胰腺癌相關(guān)成纖維細胞永生化

人風(fēng)濕性關(guān)節(jié)滑膜成纖維細胞永生化

人主動脈內(nèi)皮細胞永生化

人子宮內(nèi)膜上皮細胞永生化

人肝竇內(nèi)皮細胞永生化

人腸癌細胞永生化

人頸靜脈球瘤細胞永生化

人副神經(jīng)節(jié)瘤細胞永生化

人腸息肉上皮細胞永生化

人原代聽神經(jīng)瘤細胞永生化

人原代髓核細胞永生化

人原代神經(jīng)鞘膜瘤細胞永生化

人胰腺腫瘤成纖維細胞永生化

人眼瞼皮脂腺癌細胞永生化

人主動脈瓣膜間質(zhì)細胞永生化

人睪丸支持細胞永生化

人骨骼肌細胞永生化

人卵巢癌細胞永生化

人真皮成纖維細胞永生化

人原代甲狀旁腺主細胞永生化

人原代乳腺上皮細胞永生化

人原代乳腺癌成纖維細胞永生化

人原代軟骨細胞永生化

人臍靜脈內(nèi)皮原代細胞+GFP

人神經(jīng)母細胞瘤細胞

人神經(jīng)母細胞瘤細胞

小鼠肺成纖維細胞永生化

小鼠附睪脂肪干細胞永生化

小鼠腎小球系膜細胞永生化

小鼠胰腺星狀細胞永生化

小鼠脂肪干細胞永生化

麝香鼠原代乳腺上皮細胞永生化

小鼠骨髓巨噬細胞永生化

小鼠角膜上皮細胞永生化

小鼠肝星狀細胞永生化

大鼠腦微血管內(nèi)皮細胞永生化

大鼠內(nèi)皮祖細胞永生化

大鼠脂肪干細胞+RFP

雞胚成纖維細胞永生化

雞氣管黏膜上皮細胞永生化

鴨腦微血管內(nèi)皮細胞永生化

鴨胚成纖維細胞永生化

鴨胚肝間質(zhì)細胞永生化

羊睪丸間質(zhì)細胞永生化

湖羊瘤胃上皮細胞永生化

山羊乳腺上皮細胞永生化

豬脂肪干細胞永生化

豬扁桃體上皮細胞永生化

豬肝星狀細胞永生化

豬骨骼肌衛(wèi)星細胞永生化

豬子宮內(nèi)膜上皮細胞永生化

豬鼻腔粘膜上皮細胞永生化

豬外周血單個核細胞（PBMC）永生化

豬主動脈內(nèi)皮細胞永生化

豬小腸上皮細胞永生化

雪貂鼻腔粘膜上皮細胞永生化

兔子宮內(nèi)膜上皮細胞永生化

兔肝臟間質(zhì)細胞永生化

無外泌體血清|SBI說明書胎牛血清（FBS）已在真核細胞培養(yǎng)中使用了幾十年了。然而，很少有人關(guān)注FBS的RNA對培養(yǎng)的細胞會產(chǎn)生什么樣的生物學(xué)效應(yīng)。來自哈佛醫(yī)學(xué)院的研究人員用RNA測序，證明了FBS含有蛋白質(zhì)編碼和調(diào)控的多種RNA，包括mRNA、miRNA、rRNA和snoRNA等。它們中的大多數(shù)（>70％）仍然存在于細胞外囊泡（EV）和細胞間通訊研究中常使用的長時間超速離心得到的無囊泡FBS（vesicle-depleted FBS, vdFBS）中。FBS相關(guān)的RNA會在分離細胞外膜泡RNA（exRNA）時一同被分離出來，這會對下游RNA分析造成干擾。許多進化上保守的FBS源的RNA種類會被錯誤地認為是人或小鼠細胞的轉(zhuǎn)錄本。值得注意的是，在FBS中含量豐富的一些miRNAs，如miR-122、miR-451A和miR-1246，先前已被報道為在培養(yǎng)細胞來源的細胞外膜泡中富含的miRNAs，這可能是胎牛血清中miRNAs造成的假象。對公開可用的exRNA數(shù)據(jù)庫的分析支持FBS污染的概念。此外，FBS轉(zhuǎn)錄本可被培養(yǎng)的細胞吸收，并影響高度敏感的基因表達譜技術(shù)的結(jié)果。因此，實驗設(shè)計過程中采取減少FBS源RNA干擾的預(yù)防措施是非常有必要的。