SBI無(wú)外泌體血清EXO-FBS-50A-1使用說(shuō)明

產(chǎn)品名稱：無(wú)外泌體血清|去除外泌體胎牛血清

貨號(hào)：EXO-FBS-50A-1

規(guī)格：50ml

備注：少量現(xiàn)貨，干冰運(yùn)輸......

一、外泌體的基本信息

⊙外泌體的大小：外泌體的直徑約40-150nm

⊙從研究上來(lái)講并不太嚴(yán)格區(qū)分外泌體（exosomes）或微泡（microvesicles）

⊙外泌體屬于胞外囊泡類，除了外泌體之外細(xì)胞還分泌微泡以及其它的膜囊泡

⊙外泌體的直接比微泡的要小，后者直徑為100nm-1μm

⊙外泌體的數(shù)量：人體中大約有1014個(gè)，近乎于平均每個(gè)細(xì)胞產(chǎn)生1000-10000個(gè)

⊙外泌體的細(xì)胞源：人體中幾乎所有類型的細(xì)胞均能產(chǎn)生外泌體

⊙外泌體具有異質(zhì)性，即使是同一種細(xì)胞分泌的外泌體都有可能具有很大功能區(qū)別

⊙外泌體的存在：外泌體幾乎存在于所有的組織、細(xì)胞間隙、體液中

什么是外泌體？

答：Exosome，中文名外泌體，是一種能被大多數(shù)細(xì)胞分泌的微小膜泡，具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu)，直徑大約40-100 nm。細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體，它的主要來(lái)源是細(xì)胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體，經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到細(xì)胞外基質(zhì)中。外泌體天然存在于體液中，包括血液、尿液、唾液、腦脊液及乳汁中，參與細(xì)胞間通訊。

外泌體研究，應(yīng)選用血漿還是血清？

答：血清是血液凝固之后收集的液體，所以其中少了纖維蛋白原，凝血因子，以及多了很多凝血產(chǎn)物。纖維蛋白原可轉(zhuǎn)化為纖維蛋白，具有凝血功能。在凝血過(guò)程中血小板會(huì)分泌大量的外泌體，有研究發(fā)現(xiàn)血清中有接近50%的外泌體來(lái)自額外的分泌。

血漿=血液-血細(xì)胞  

血清=血漿-纖維蛋白原-凝血因子

所以一般實(shí)驗(yàn)選擇血漿，在特殊情況下，如研究與血小板相關(guān)的疾病的時(shí)候，當(dāng)然是血清更適合。

二、外泌體研究的主要應(yīng)用
外泌體的功能取決于其所來(lái)源的細(xì)胞類型，其可參與到機(jī)體免疫應(yīng)答、抗原提呈、細(xì)胞遷移、細(xì)胞分化、腫瘤侵襲等方方面面。有研究表明腫瘤來(lái)源的外泌體參與到腫瘤細(xì)胞與基底細(xì)胞的遺傳信息的交換，從而導(dǎo)致大量新生血管的生成，促進(jìn)了腫瘤的生長(zhǎng)與侵襲。
腫瘤

• 腫瘤轉(zhuǎn)移。來(lái)自白血病干細(xì)胞的外泌體促進(jìn)急性骨髓性白血病（AML）細(xì)胞的增殖、遷移和抑制細(xì)胞凋亡。
• 治療靶標(biāo)。利用外泌體遞送小干擾RNA來(lái)沉默KRAS G12D，從而特異性高效靶向至胰腺癌細(xì)胞，以顯著降低RAS活化、癌細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移過(guò)程。

免疫

• β細(xì)胞將含有蛋白質(zhì)和miRNA的外泌體釋放到細(xì)胞外，并可轉(zhuǎn)移到其他代謝器官或免疫內(nèi)皮細(xì)胞，有利于維持葡萄糖體內(nèi)平衡或造成胰島素抵抗。

心血管

• 外泌體介導(dǎo)miR-155從平滑肌細(xì)胞轉(zhuǎn)移到內(nèi)皮細(xì)胞導(dǎo)致了內(nèi)皮細(xì)胞的損傷促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化

分子標(biāo)記

• 疾病診斷。在酒精性肝病、NASH、病毒性肝炎、藥物性肝損傷和肝細(xì)胞癌中發(fā)現(xiàn)循環(huán)EVs的水平上升。
• 預(yù)后標(biāo)志。

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蘇州千舍帶你了解下外泌體！ 外泌體到底是個(gè)啥？莫愁：外泌體么，簡(jiǎn)單點(diǎn)講就是：“老司機(jī)，帶帶我……”。大概就是在細(xì)胞內(nèi)部由細(xì)胞內(nèi)多泡體形成的一個(gè)囊泡，裝載了一堆亂七八糟的東西，然后分泌出體外，然后進(jìn)入另一個(gè)細(xì)胞，把這堆亂七八糟的東西卸車的一個(gè)過(guò)程。

外泌體大小跟病毒差不多大，反正是蠻小的了。

所以外泌體的研究方法基本是這樣的：

首先，用無(wú)外泌體的血清培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，否則就干擾了。

接著，就是低速離心去除細(xì)胞。

然后通過(guò)過(guò)濾，剛剛也說(shuō)過(guò)大小了哈，過(guò)濾后，把細(xì)胞微泡去除掉，剩下的就是外泌體了。

接著高速離心，富集外泌體：

然后，研究的套路一般都是進(jìn)行外泌體的鑒定，可以通過(guò)電鏡，或者WB來(lái)鑒定，因?yàn)橥饷隗w是有標(biāo)志物的，像下面這樣：

這時(shí)候可以選擇細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的特異性分子Calnexin來(lái)作為陰性對(duì)照。

用外泌體也可以做流式分析，但是，外泌體做流式分析，但是，你要記住外泌體很小，跟病毒差不多大。所以做流式前要用包被了抗體的珠子（beads）先結(jié)合上外泌體，然后進(jìn)行流式的分析，就像這樣：

實(shí)關(guān)鍵還是在外泌體內(nèi)部的那些miRNA和mRNA的抽提和鑒定，研究外泌體的具體機(jī)制，還是靠上車的這堆貨。

現(xiàn)在大概了解外泌體研究要做些什么了吧？

一般來(lái)說(shuō)，這個(gè)老司機(jī)帶上車的都是些miRNA和mRNA，不過(guò)大概也有l(wèi)ncRNA，有的時(shí)候不巧也會(huì)有點(diǎn)DNA。下面就是外泌體里一般的RNA分布，有蠻多miRNA，所以老司機(jī)外泌體有可能會(huì)參與某些調(diào)控機(jī)制。

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