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2020-3
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細(xì)胞培養(yǎng)中的不貼壁及分化的解決辦法
細(xì)胞培養(yǎng)中的不貼壁及分化的解決辦法如果細(xì)胞呈現(xiàn)不貼壁現(xiàn)象，且細(xì)胞根本就不能錨定的解決辦法:1、可以在鋪有瓊脂和瓊脂糖的培養(yǎng)皿上克隆細(xì)胞，也可在襯有瓊脂的甲基纖維素的非組織培養(yǎng)用平皿制備細(xì)胞克隆。2、在這些支持物中應(yīng)適當(dāng)添加生長因子及添加物。3、如使用組織培養(yǎng)用平皿克隆細(xì)胞，應(yīng)在灌制瓊脂等支持物前鋪加飼養(yǎng)層。如果細(xì)胞呈現(xiàn)不貼壁現(xiàn)象，但細(xì)胞能夠錨定但貼壁不佳的解決辦法:使用鋪加了甲基纖維素的組織培養(yǎng)用用培養(yǎng)皿進(jìn)行細(xì)胞克隆。細(xì)胞培養(yǎng)如果細(xì)胞不發(fā)生分化，解決辦法如下：1、更換能夠誘導(dǎo)...
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2020-3
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蘇州千舍生物-細(xì)胞培養(yǎng)知識之胰酶和雙抗
蘇州千舍生物-細(xì)胞培養(yǎng)知識之胰酶和雙抗胰酶和雙抗作為細(xì)胞培養(yǎng)過程中試劑的一部分，對細(xì)胞培養(yǎng)成功與否存在著關(guān)鍵的作用。但是對于胰酶和雙抗的基礎(chǔ)知識還是要多多了解的，不然就有可能禍禍你的細(xì)胞哦！一、胰酶胰酶是一種解離試劑，本質(zhì)是可以降解蛋白的酶，生物學(xué)實驗中常用來把貼壁細(xì)胞從貼壁面解離下來和使細(xì)胞解聚，也可以用于原代細(xì)胞的傳代過程中分散組織。胰酶使用的濃度是多少？常見濃度為0.25%的胰酶（含有螯合劑），半貼壁細(xì)胞或者對胰酶敏感的細(xì)胞，可采用0.05%濃度的胰酶（含有或者不含有螯...
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2020-3
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蘇州千舍生物-細(xì)胞培養(yǎng)知識之細(xì)胞液黑色運(yùn)動顆粒物
蘇州千舍生物-細(xì)胞培養(yǎng)知識之細(xì)胞液黑色運(yùn)動顆粒物在細(xì)胞培養(yǎng)中常可見到細(xì)胞及培養(yǎng)液中有一些大小不等、形態(tài)不同的黑色顆粒在運(yùn)動。如果鏡下檢查(100x)每視野計數(shù)在10個以上者就可能使細(xì)胞生長受到影響，如果其數(shù)量再增多細(xì)胞可停止增殖繼而死亡。人們常稱這種顆粒為黑膠蟲或中毒顆粒。一、關(guān)于黑膠蟲的描述1、分類上的描述：對于黑膠蟲的分類，學(xué)術(shù)界沒有明確給予說法。關(guān)于黑膠蟲的分類，目前大部分人認(rèn)為黑膠蟲污染是微生物感染。在一些文章論述上把黑膠蟲歸為生物污染類型，但是沒把它歸為確定的生物分...
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2020-3
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酶聯(lián)免疫吸附實驗 ELISA
酶聯(lián)免疫吸附實驗ELISA一．實驗?zāi)康拿嘎?lián)免疫吸附測定（enzyme-linkedimmunosorbentassay簡稱ELISA）是在免疫酶技術(shù)（immunoenzymatictechniques）的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新型的免疫測定技術(shù),ELISA過程包括抗原（抗體）吸附在固相載體上稱為包被，加待測抗體（抗原）,再加相應(yīng)酶標(biāo)記抗體（抗原）,生成抗原（抗體）--待測抗體（抗原）--酶標(biāo)記抗體的復(fù)合物，再與該酶的底物反應(yīng)生成有色產(chǎn)物。借助分光光度計的光吸收計算抗體（抗原）的...
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2020-3
15

蘇州千舍生物 ELISA試劑盒樣本處理方法
樣品前處理：a)對于貼壁細(xì)胞：去除培養(yǎng)液，用PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。b)對于懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞，用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液，再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多，必需分裝成50-100萬細(xì)胞/管，然后再裂解。c)對于組織樣品：把組織剪切成細(xì)小的碎片。按照每20...
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2020-3
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蘇州千舍生物提示細(xì)胞培養(yǎng)需注意哪些細(xì)節(jié)
蘇州千舍生物提示細(xì)胞培養(yǎng)需注意哪些細(xì)節(jié)養(yǎng)細(xì)胞是一件戳心戳肺的事情，你要像照顧小孩一樣仔細(xì)對待，愛護(hù)她，呵護(hù)她。如果你照顧的時候能注意這些問題，會讓你的細(xì)胞養(yǎng)的更好。下面就將養(yǎng)細(xì)胞的注意事項跟大家交流一下。一、細(xì)胞培養(yǎng)前的準(zhǔn)備在您帶上手套開始細(xì)胞培養(yǎng)之前,先檢查一下移液管和瓶子的數(shù)量是否充足,以免在開始實驗后再次出入操作臺，這樣可以降低細(xì)胞污染的風(fēng)險。細(xì)胞培養(yǎng)基也應(yīng)先預(yù)熱,選擇只預(yù)熱部分培養(yǎng)基而非整瓶加熱,不但可以節(jié)約實驗時間,而且可以避免因反復(fù)加熱培養(yǎng)基而造成的蛋白質(zhì)降解。結(jié)...
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2020-3
13

蘇州千舍生物教你如何挽救細(xì)胞污染
蘇州千舍生物教你如何挽救細(xì)胞污染以自建細(xì)胞系(laryngealsquamouscarcinoma-1，LSC-1)第12代的某一被細(xì)菌污染的細(xì)胞株采取救治，比較效果并分析細(xì)胞生物學(xué)特性。一、實驗方法1、抗生素法：細(xì)菌培養(yǎng)：用無抗生素*培養(yǎng)液培養(yǎng)細(xì)胞3d，收集上清離心后將沉淀物接種于血瓊脂培養(yǎng)基，35e培養(yǎng)。所采用的抗生素包括臨床常用的15種抗生素，抗生素zui適抑菌濃度篩選:根據(jù)細(xì)菌藥敏實驗結(jié)果選出敏感抗生素，每種抗生素從zui低抑菌濃度MIC到zui高耐藥濃度分別配制6個...
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2020-3
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蘇州千舍生物教你如何解決“細(xì)胞空泡化”
蘇州千舍生物教你如何解決“細(xì)胞空泡化”“細(xì)胞空泡化”在細(xì)胞培養(yǎng)中也是一個常見問題，它的出現(xiàn)原因有多種，實驗人員碰到往往會很頭疼。在文章中小給列舉出了可能出現(xiàn)這種情況的原因，方便大家進(jìn)行分析選擇解決的方法。一、可以引起細(xì)胞空泡化出現(xiàn)的原因有哪些？1.細(xì)胞老化原代細(xì)胞培養(yǎng)的過程中經(jīng)常出現(xiàn)這樣的情況，是有些細(xì)胞處于終末分化狀態(tài)，不會再分裂，時間長了就會空泡化而死亡。傳代細(xì)胞出現(xiàn)這種狀況比較少見，出現(xiàn)的原因一般都是因為細(xì)胞傳代次數(shù)過多，老化嚴(yán)重。2.PH值培養(yǎng)液的PH值與細(xì)胞正常所需...
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