產品名稱：WinSera®優(yōu)級免分裝胎牛血清

貨號：FBS50-WS-002

規(guī)格：50ml*10

產品特點：

1、50ml規(guī)格，無需分裝，降低污染可能性。

2、三次0.1μm無菌過濾。

3、高品質低內毒素，適合多種細胞培養(yǎng)

4、高性價比，批次差異小，質量穩(wěn)定。

WinSera胎牛血清，50ml規(guī)格便捷裝，遠離分鐘污染風險，即取即用。

§細胞抱團怎么處理?

一些懸浮細胞抱團生長是正?，F(xiàn)象，大部分懸浮細胞在細胞密度很高的情況下，很可能會出現(xiàn)部分細胞抱團生長的現(xiàn)象，聚團細胞很容易死亡并演化成絮狀物，殃及周圍的懸浮細胞，因此在培養(yǎng)懸浮細胞時需控制好細胞密度。如果出現(xiàn)了細胞團，可以通過細胞篩去掉部分較大的細胞團，也可以嘗試一下方法：將細胞懸液收集到15 ml離心管中，靜置20 min左右，小心取上層細胞上清培養(yǎng)(該方法只能去除部分較大的細胞團)。

§細胞內有空泡，是否是正常現(xiàn)象?

部分細胞本身存在一定的空泡(如HepG2，Ishikawa及一些耐藥株等)，這個是正?，F(xiàn)象。如果只有少數細胞有內出現(xiàn)極少空泡，則很可能是細胞狀態(tài)不佳，可以通過調整血清濃度，控制消化，控制傳代比例及時間等方法來調整細胞狀態(tài);如果大部分細胞出現(xiàn)空泡，且單個細胞內空泡數目偏多，則可能細胞代次較高，細胞老化所致，需更換代次較早的細胞。

§細胞傳兩代后開始逐漸死亡的原因

很可能是培養(yǎng)體系不適合細胞(未使用推薦的培養(yǎng)體系);或者消化過度，對細胞有嚴重影響;或者是傳代比例不合適(具有密度依賴性的細胞，傳代太稀;或者生長較快的細胞，傳代較密，細胞嚴重堆疊生長)。

§細胞生長逐漸變慢是什么原因?

細胞增殖變慢有以下原因：1. 消化過度 2. 傳代過密 3.細胞營養(yǎng)不良 4.細胞頻繁傳代 5.細胞狀態(tài)不佳或老化 6.細胞存在污染。

§培養(yǎng)細胞時應使用5%或10%CO2?

一般培養(yǎng)基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作為pH的緩沖系統(tǒng)，而培養(yǎng)基中NaHCO3的含量將決定細胞培養(yǎng)時應使用的CO2濃度。當培養(yǎng)基中NaHCO3含量為每公升3.7 g時，細胞培養(yǎng)時應使用10% CO2;當培養(yǎng)基中NaHCO3為每公升1.5 g時，則應使用5% CO2培養(yǎng)細胞。

§CO2培養(yǎng)箱之水盤如何保持清潔?

定期(每周一次)更換水盤里面的水，水盤的水必須使用無菌蒸餾水或無菌去離子，水盤中可添加1%硫酸銅以預防霉菌污染。

§細胞接種密度多少合適?

依照細胞株基本數據上的接種密度或稀釋分盤的比例接種即可。細胞數太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長的一個重要原因。按照我們的經驗：一般倍增時間24 h內的細胞，傳代比率1:6-1:12為宜，倍增時間24-48 h的細胞，傳代比率1:3-1:8為宜，倍增時間超過48h的細胞, 傳代比率1:2-1:4為宜。因此選擇正確的，靠譜的胎牛血清及廠家極其重要↓↓↓↓

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DECO0109

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WS10013CHO-HCV-p7 中國倉鼠卵巢癌細胞系

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WS10015CHO-HCV-NS3中國倉鼠卵巢癌細胞系

WS10016CHO-HCV-NS4A 中國倉鼠卵巢癌細胞系

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WS10018CHO-HCV-NS5A 中國倉鼠卵巢癌細胞系

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WS10020MR1 [derivative of HB-11048]中國倉鼠X小鼠B淋巴細胞雜交瘤

WS10021BHK 敘利亞倉鼠腎細胞2n=42

WS10022HIT-T15 敘利亞倉鼠胰島β細胞

WS10023BRL大鼠肝細胞

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WS10025H9C2大鼠心肌細胞

WS10026PC-12大鼠嗜鉻細胞瘤細胞（未分化）

WS10027SHZ-88大鼠乳腺癌細胞

WS10028H4-ⅡE 大鼠肝癌細胞系

WS10029HBZY－1 大鼠腎小球系膜細胞EC

WS10030MADB106  大鼠乳腺腺癌細胞系

WS10031A7r5大鼠胸大動脈平滑肌細胞

WS10032L6大鼠成肌細胞

WS10033NR8383大鼠肺泡巨噬細胞

WS10034RH-35 大鼠肝癌細胞

WS10035BRL 3A大鼠肝細胞

WS10036UMR-106大鼠骨肉瘤細胞

WS10037Y3-Ag 1.2.3大鼠骨髓瘤細胞

WS10038C6大鼠膠質瘤細胞

WS10039PC-12(低分化)大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(低分化)

WS10040PC-12(高分化)大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(高分化)

WS10041NRK大鼠腎細胞

WS10042NRK-52E大鼠腎細胞

WS10043RBL-2H3大鼠嗜堿性細胞白血病細胞

WS10044RSC96大鼠雪旺細胞

WS10045RIN-m5f 大鼠胰島細胞

WS10046RBL-1 大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞

WS10047RMSC-bm SD大鼠骨髓MSC細胞

血清使用需要注意的問題

（一）被誤判為污染的“小黑點"

經過熱處理的血清，往往沉淀物會增多，而這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察像是污染物，常常會讓研究者誤以為血清遭到污染。然而，把血清放在37℃環(huán)境中，又會使此沉淀物進一步增多，使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。

我們的經驗是拿到鏡下去觀察是否為細菌狀或真菌狀形態(tài)。還有就是做無菌培養(yǎng)，取一點血清在培養(yǎng)皿中，在培養(yǎng)箱里培養(yǎng)幾天，觀察沉淀物是否有變化。一般情況下，這些沉淀物并不會影響血清的正常使用，Lab里往往用0.22μM的濾膜過濾一下就繼續(xù)使用了。

（二）解凍血清

解凍血清時，請遵循推薦的分步解凍方法（-20℃→4℃→室溫）。實驗表明，如果血清解凍溫度過高（如-20℃→37℃），很容易產生沉淀。解凍血清時，請隨時搖勻，使溫度和成分均勻，減少沉淀的發(fā)生。請不要長時間將血清放置在37℃環(huán)境中，如果放置時間過長，血清會變得混濁，血清中的許多不穩(wěn)定成分會受到破壞，從而影響血清的質量。血清的熱滅活很容易引起沉淀物的增加，我們認為這一步是不必要的。如需對血清進行熱滅活，請遵循56℃、30min原則，隨時搖勻。如果溫度過高、時間過長或搖晃不均勻，沉淀物就會增加。

血清中出現(xiàn)沉淀物的原因有很多，但最常見的是血清中脂蛋白的變性，解凍后血清中還會存在纖維蛋白（形成凝塊的蛋白質之一），這也是產生沉淀物的主要原因之一。然而，這些絮狀沉淀物雖然并不影響血清本身的質量，但有可能會被誤判為污染物。如果要去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝在無菌離心管中，以1200rpm的速度離心，然后將上清液加入培養(yǎng)基中進行過濾。

（三）保存血清

避免血清出現(xiàn)非污染性沉淀物的最好方法就是減少血清反復凍融的次數，所以血清少量分裝凍存是一個好方法。建議血清保存在-20～-5℃之間。如果以4℃保存，不要超過一個月。如果一次不能用完一瓶，建議將血清分裝到無菌離心管中，然后再凍存。

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