細(xì)胞名稱：人結(jié)直腸癌細(xì)胞氟尿嘧啶耐藥細(xì)胞

細(xì)胞代碼： L15+10%FBS +1%P/S   

培養(yǎng)條件：DMEM+15%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%P/S

生長(zhǎng)狀態(tài)：貼壁生長(zhǎng)

人結(jié)直腸癌細(xì)胞氟尿嘧啶耐藥細(xì)胞

人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞永生化

人腸癌細(xì)胞永生化

人頸靜脈球瘤細(xì)胞永生化

人副神經(jīng)節(jié)瘤細(xì)胞永生化

人腸息肉上皮細(xì)胞永生化

人原代聽神經(jīng)瘤細(xì)胞永生化

人原代髓核細(xì)胞永生化

人原代神經(jīng)鞘膜瘤細(xì)胞永生化

人胰腺腫瘤成纖維細(xì)胞永生化

人眼瞼皮脂腺癌細(xì)胞永生化

人主動(dòng)脈瓣膜間質(zhì)細(xì)胞永生化

人睪丸支持細(xì)胞永生化

人骨骼肌細(xì)胞永生化

人卵巢癌細(xì)胞永生化

人真皮成纖維細(xì)胞永生化

人原代甲狀旁腺主細(xì)胞永生化

人原代乳腺上皮細(xì)胞永生化

人原代乳腺癌成纖維細(xì)胞永生化

人原代軟骨細(xì)胞永生化

人臍靜脈內(nèi)皮原代細(xì)胞+GFP 原代細(xì)胞+GFP

人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 sh-sy5y轉(zhuǎn)染突變型

人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 sh-sy5y轉(zhuǎn)染野生型

小鼠肺成纖維細(xì)胞永生化

小鼠附睪脂肪干細(xì)胞永生化

小鼠腎小球系膜細(xì)胞永生化

小鼠胰腺星狀細(xì)胞永生化

小鼠脂肪干細(xì)胞永生化

麝香鼠原代乳腺上皮細(xì)胞永生化

小鼠骨髓巨噬細(xì)胞永生化

小鼠角膜上皮細(xì)胞永生化

小鼠肝星狀細(xì)胞永生化

大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞永生化

大鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞永生化

大鼠脂肪干細(xì)胞+RFP 原代細(xì)胞+RFP

雞胚成纖維細(xì)胞永生化

雞氣管黏膜上皮細(xì)胞永生化

鴨腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞永生化

鴨胚成纖維細(xì)胞永生化 Duck embryo

鴨胚肝間質(zhì)細(xì)胞永生化

羊睪丸間質(zhì)細(xì)胞永生化

湖羊瘤胃上皮細(xì)胞永生化

山羊乳腺上皮細(xì)胞永生化

豬脂肪干細(xì)胞永生化

豬扁桃體上皮細(xì)胞永生化

豬肝星狀細(xì)胞永生化

豬骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞永生化

豬子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞永生化

豬鼻腔粘膜上皮細(xì)胞永生化

豬外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMC）永生化

豬主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞永生化

豬小腸上皮細(xì)胞永生化

雪貂鼻腔粘膜上皮細(xì)胞永生化

兔子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞永生化

兔肝臟間質(zhì)細(xì)胞永生化

37.如何從T25瓶中轉(zhuǎn)移sf9細(xì)胞？能用蛋白酶消化嗎？

我們推薦使用脫落細(xì)胞的方法，此技術(shù)破壞性最小，生活力最高。通過使用巴斯德吸液管，讓細(xì)胞上培養(yǎng)基流動(dòng)。作為一種選擇你也可以輕輕拍打培養(yǎng)瓶。只有在絕對(duì)必要的情況下，才使用胰消化細(xì)胞。

38.胰消化一個(gè)T25瓶的sf9細(xì)胞：

1. 去除培養(yǎng)基。

2. 用2ml 1xPBS（足以覆蓋細(xì)胞表面）洗滌細(xì)胞，去除PBS。

3. 加入2ml 1x胰EDTA（恰好覆蓋細(xì)胞表面）。

4. 37 ℃孵育5到10分鐘。在儀器下檢測(cè)看到5分鐘后它們正在向上移動(dòng)。

5. 向細(xì)胞中加入2ml 細(xì)胞培養(yǎng)液，移入錐形管，用2ml培養(yǎng)液洗瓶壁，移入同一錐形管中。（培養(yǎng)基中的FBS終止了胰的活性。）

6. 離心（1100rpm）沉淀細(xì)胞。去除培養(yǎng)基。

7. 用新的培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。傳代。

39.在Sf9, Sf21, 和high Five細(xì)胞懸浮培養(yǎng)時(shí)，肝素的使用量是多少？

為了防止懸浮培養(yǎng)細(xì)胞聚集的形成，使用肝素濃度為10單位/毫升細(xì)胞懸液。

40.在重新凍存sf9細(xì)胞前，它可以傳多少代？隨著傳代的次數(shù)的增加，它的感染能力會(huì)降低嗎？

通常情況當(dāng)細(xì)胞經(jīng)過30次傳代后，應(yīng)該返回凍存。無論什么時(shí)候計(jì)數(shù)時(shí)，都應(yīng)該檢查細(xì)胞活力。如果超過95％的細(xì)胞保持有活力和在大約30小時(shí)左右加倍，細(xì)胞仍然可以使用。如果活力和加倍時(shí)間下降，它們的感染力將不在是有效的。

41.貯存在冰箱中的瓶口已開的培養(yǎng)基，在放置幾天后顏色變紫?

這主要是由于在暴露到周圍的CO2水平時(shí)，碳酸氫納導(dǎo)致了pH值的上升。您可以在使用前松開瓶口，在CO2培養(yǎng)箱孵育培養(yǎng)基10-15分鐘，來校正溶液的pH值（確定松開瓶口以保證氣體交換）。

42. 細(xì)胞培養(yǎng)基偶然被凍，可否繼續(xù)使用？

如果細(xì)胞培養(yǎng)基偶然被凍，您應(yīng)該熔化培養(yǎng)基并觀察是否有沉淀產(chǎn)生。如果沒有沉淀產(chǎn)生，培養(yǎng)基可以正常使用，如果出現(xiàn)沉淀，只能丟棄這些培養(yǎng)基。

43. 無血清培養(yǎng)與有血清培養(yǎng)使用的抗生素量一樣嗎？

當(dāng)在無血清培養(yǎng)基中添加抗生素時(shí)，降低至少在有血清培養(yǎng)基中所使用濃度的50%。血清蛋白會(huì)結(jié)合和滅活一些抗生素。在無血清培養(yǎng)條件下，抗生素不被滅活，可能對(duì)于細(xì)胞達(dá)到毒性水平。

44. 培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后，可長(zhǎng)期保存嗎？

一旦您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時(shí)，您應(yīng)該在兩到三周內(nèi)使用它。因?yàn)橐恍┛股睾脱逯械幕境煞衷诮鈨龊缶烷_始降解。

45.培養(yǎng)基及其它添加物和試劑可反復(fù)凍融嗎？

大部分添加物和試劑最多可以凍融3次，如果次數(shù)更多都會(huì)在包含蛋白的溶液引起一定水平的降解和沉淀，將會(huì)影響它的性能。