Cegrogen胎牛血清A0500-3011（低內(nèi)毒素）使用說(shuō)明

1.初次開(kāi)封胎牛血清如何化凍？

胎牛血清常規(guī)儲(chǔ)存溫度為-20℃，如果更加長(zhǎng)期保存可以-80℃保存。解凍的時(shí)候不建議直接放在常溫中（25-37℃）解凍，很容易產(chǎn)生絮狀沉淀，進(jìn)而有可能影響血清品質(zhì)。建議的方式為先由-20/-80℃轉(zhuǎn)移到4℃解凍，全部為液體后，再由4℃轉(zhuǎn)移到室溫。在解凍的過(guò)程中，需要隨時(shí)晃動(dòng)，使血清內(nèi)成分和溫度混合均勻，有助于減少沉淀的產(chǎn)生。解凍后，就可以把血清用15 mL或者50 mL無(wú)菌離心管分裝凍存啦，可以根據(jù)自己使用血清的頻率在4℃存放一管已化凍分裝的血清，方便經(jīng)常配制培養(yǎng)基，在4℃也不可以存放太久，最好在一個(gè)月內(nèi)用完。解凍后的胎牛血清不可以在37℃或者室溫存放太久，避免血清中重要的細(xì)胞生長(zhǎng)因子失活而影響細(xì)胞狀態(tài)。

2.血清的用量

原則上血清添加量不宜太多，通常添加5%、10%、20%。大部分細(xì)胞正常培養(yǎng)使用10%的血清濃度，部分細(xì)胞原代提取時(shí)使用20%血清。具體某一株細(xì)胞適應(yīng)的血清濃度，需要根據(jù)細(xì)胞特性、實(shí)驗(yàn)?zāi)康拿鳌?/span>

3.胎牛血清什么時(shí)候需要熱滅活？

這就涉及到什么是熱滅活。熱滅活一般是以56℃，30 min來(lái)處理已解凍的血清，因?yàn)榇思訜岵襟E，可以使補(bǔ)體去活化，而補(bǔ)體所參與的反應(yīng)有：溶細(xì)胞活性，平滑肌的收縮，肥大細(xì)胞和血小板組胺的釋放，增強(qiáng)吞噬作用，淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的趨化和激活。除了這些特殊實(shí)驗(yàn)要求，常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)需要熱滅活嗎？通常來(lái)說(shuō)，熱滅活對(duì)大多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)都不是必須進(jìn)行的步驟，經(jīng)此處理過(guò)的血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)作用很小，甚至可能會(huì)因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量，而造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率的降低，沉淀物增多等不好的影響。

4.更換血清的正確步驟。

養(yǎng)細(xì)胞的小伙伴經(jīng)常會(huì)遇到同一個(gè)細(xì)胞需要更換血清的情況。如果將另一款血清配制的培養(yǎng)基直接用于細(xì)胞培養(yǎng)，可能會(huì)發(fā)現(xiàn)以前增殖很快的細(xì)胞突然變慢甚至逐漸脫壁死亡了。這種情況下，多數(shù)為細(xì)胞被以往的培養(yǎng)環(huán)境馴化，突然更換一個(gè)新的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境，哪怕是品質(zhì)更好的血清，也可能會(huì)出現(xiàn)不適應(yīng)的情況。通常來(lái)說(shuō)，更換血清的時(shí)候我們會(huì)遵循梯度更換保證細(xì)胞可以適應(yīng)。血清開(kāi)始使用時(shí)，如果是重新復(fù)蘇細(xì)胞，建議用原培養(yǎng)體系進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇，待細(xì)胞狀態(tài)恢復(fù)后再進(jìn)行測(cè)試。測(cè)試時(shí)不建議直接100%換成新血清體系進(jìn)行培養(yǎng)，應(yīng)按照比例梯度替換。例如，先換液按照新舊體系1:3，第二次換液1:1，第三次換液3:1，而后替換。針對(duì)一些對(duì)培養(yǎng)體系較為敏感的細(xì)胞，需進(jìn)一步細(xì)化替換比例。

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胎牛血清（Fetal Bovine Serum, FBS）和小牛血清（Calf Serum, CS）是兩種常見(jiàn)的生物試劑，廣泛應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)和生物學(xué)研究。它們的主要區(qū)別在于哪些呢？

1、來(lái)源

胎牛血清（FBS）：來(lái)源于懷孕母牛的胎兒血液。胎牛血清通常是在牛胎兒被取出后，通過(guò)心臟穿刺方式收集血液，然后分離血清。

小牛血清（CS）：來(lái)源于出生后小牛的血液。通常收集3個(gè)月以下的小牛血液，再經(jīng)過(guò)離心分離血清。

2、成分

胎牛血清（FBS）：含有較高濃度的生長(zhǎng)因子、激素和低水平的免疫球蛋白。這些成分對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)非常有利，特別是對(duì)敏感細(xì)胞系的培養(yǎng)。

小牛血清（CS）：含有相對(duì)較高的免疫球蛋白和低水平的生長(zhǎng)因子。由于小牛已經(jīng)暴露于外界環(huán)境，其血清中的免疫球蛋白水平較高，可能會(huì)影響某些實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

3、使用領(lǐng)域

胎牛血清（FBS）：

廣泛用于各種細(xì)胞培養(yǎng)，包括哺乳動(dòng)物細(xì)胞系、干細(xì)胞和初級(jí)細(xì)胞培養(yǎng)。由于其成分比較均勻和豐富的生長(zhǎng)因子，它被認(rèn)為是優(yōu)質(zhì)的血清類(lèi)型。

小牛血清（CS）：多用于培養(yǎng)耐受性較高的細(xì)胞系或在不需要高水平生長(zhǎng)因子的實(shí)驗(yàn)中使用。也可以用于較低成本的應(yīng)用或?qū)嶒?yàn)中。

4、價(jià)格

胎牛血清（FBS）：

由于其高質(zhì)量和廣泛的應(yīng)用，FBS通常比小牛血清貴得多。

小牛血清（CS）：價(jià)格相對(duì)較低，適用于預(yù)算有限的研究項(xiàng)目。

5、優(yōu)缺點(diǎn)

胎牛血清（FBS）：

優(yōu)點(diǎn)：成分均勻，生長(zhǎng)因子和激素含量高，適用于大多數(shù)細(xì)胞系。

缺點(diǎn)：價(jià)格昂貴，有倫理爭(zhēng)議。

小牛血清（CS）：

優(yōu)點(diǎn)：價(jià)格較低，可用于耐受性細(xì)胞系的培養(yǎng)。

缺點(diǎn)：免疫球蛋白含量較高，可能影響某些實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

6、總結(jié)

胎牛血清和小牛血清在成分、來(lái)源和應(yīng)用上有顯著不同。胎牛血清更適合需要高質(zhì)量培養(yǎng)條件的實(shí)驗(yàn)，而小牛血清則適用于較為耐受的細(xì)胞系和成本敏感的實(shí)驗(yàn)。選擇哪種血清需要根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)需求、預(yù)算和細(xì)胞類(lèi)型來(lái)決定。