小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞 RGC-5培養(yǎng)小技巧    

簡(jiǎn)介：

培養(yǎng)條件：1640+10%FBS+1%P/S

生長(zhǎng)狀態(tài)：貼壁生長(zhǎng)

不能“一放了之"。

水在低于零度的條件下會(huì)結(jié)冰。將細(xì)胞懸浮在溶液中，隨著溫度降低，細(xì)胞外部的水分會(huì)首先結(jié)冰，所形成的冰晶會(huì)造成細(xì)胞膜和細(xì)胞器的破壞而引起細(xì)胞死亡；未結(jié)冰的溶液中電解質(zhì)濃度升高，如果將細(xì)胞暴露在這樣高溶質(zhì)的溶液中且時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，細(xì)胞膜上脂質(zhì)分子會(huì)受到損壞，細(xì)胞便發(fā)生滲漏，因此復(fù)溫時(shí)大量水分會(huì)進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，造成細(xì)胞死亡。

如果在溶液中加入冷凍保護(hù)劑，則可保護(hù)細(xì)胞免受溶質(zhì)損傷和冰晶損傷。如圖2所示，左圖沒(méi)有凍存保護(hù)劑，細(xì)胞內(nèi)冰晶較多，右圖有凍存保護(hù)劑細(xì)胞冰晶明顯較少，原因是冷凍保護(hù)劑易與溶液中的水分子結(jié)合，從而降低冰點(diǎn)，減少冰晶的形成，并且通過(guò)改變未結(jié)冰溶液中電解質(zhì)的濃度降低其滲透壓摩爾濃度，使細(xì)胞免受溶質(zhì)損傷。1950年smith AU第一次成功利用甘油凍存了紅細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)了凍存保護(hù)劑是影響凍存效果的一個(gè)關(guān)鍵因素。

前面說(shuō)的都是怎樣更好地凍細(xì)胞，那么凍完的細(xì)胞如何怎樣長(zhǎng)期保存呢？

最關(guān)鍵的是冷凍保存溫度。冷凍保存溫度是指能長(zhǎng)期保存細(xì)胞的超低溫度，在此溫度下，細(xì)胞生化反應(yīng)極其緩慢甚至停止，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期保存，在復(fù)蘇后仍能保持正常的結(jié)構(gòu)和功能。不同的細(xì)胞和生物體以及使用不同的冷凍保存方法要取得同樣的冷凍保存效果，冷凍保存溫度可以不同，但從實(shí)際和效益的觀點(diǎn)出發(fā)，液態(tài)氮的低溫環(huán)境(-196℃)是目前最佳的冷凍保存溫度。在-196℃時(shí)，細(xì)胞的生命活動(dòng)幾乎*停止，但復(fù)蘇后細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能卻完好。如果冷凍過(guò)程得當(dāng)，一般生物樣品在-196℃下可保存十年以上。應(yīng)用-70℃~-80℃保存細(xì)胞，短期內(nèi)對(duì)細(xì)胞的活性無(wú)明顯影響，但隨著凍存時(shí)間延長(zhǎng)，細(xì)胞存活率明顯降低。

總的來(lái)說(shuō)，細(xì)胞凍存是保障細(xì)胞培養(yǎng)的持續(xù)穩(wěn)定進(jìn)展的重要組成部分。標(biāo)準(zhǔn)化的大規(guī)模細(xì)胞凍存平臺(tái)技術(shù)的發(fā)展，對(duì)建立質(zhì)量?jī)?yōu)異且均一穩(wěn)定的生產(chǎn)用細(xì)胞庫(kù)更是重中之重。

小鼠肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞 AML-12

小鼠腦神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞 G422

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 3T3-L1

小鼠乳腺癌細(xì)胞 4T1

小鼠乳腺癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 4T1+luc

小鼠巨噬細(xì)胞 Ana-1

小鼠胚胎瘤細(xì)胞 ATDC5

小鼠黑色素瘤細(xì)胞 B16

小鼠黑色素瘤細(xì)胞 B16-F10

小鼠黑色素瘤細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 B16-F10+LUC

小鼠原B細(xì)胞株 BAF3

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 BALB/3T3 clone A31

小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞株 bEnd.3

小鼠胰島素瘤胰島Beta細(xì)胞 Beta-TC-6

小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞 BV2

小鼠神經(jīng)干細(xì)胞 C17.2

小鼠成肌細(xì)胞 C2C12

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 C3H/10T1/2 Clone8  

小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞 CT26

小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 CT26+LUC

小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞 CT26.WT

小鼠胚胎干細(xì)胞 E14

小鼠淋巴瘤細(xì)胞 EL-4

小鼠乳腺癌細(xì)胞 EMT6

小鼠精原細(xì)胞系 GC-1 spg

小鼠精母細(xì)胞系 GC-2 SPd(ts)

小鼠膠質(zhì)細(xì)胞瘤 GL-261

小鼠膠質(zhì)細(xì)胞瘤熒光素酶標(biāo)記 GL-261+luc

小鼠垂體瘤細(xì)胞 GT1-1

小鼠肝癌細(xì)胞 H22

小鼠乳腺上皮細(xì)胞 HC11

小鼠肝癌細(xì)胞 HEPA1-6

小鼠肝癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 HEPA1-6+LUC

小鼠心肌細(xì)胞 HL-1

小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞 HT-22

小鼠卵巢上皮癌細(xì)胞 ID8

小鼠卵巢上皮癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 ID8+LUC

小鼠單核巨噬細(xì)胞 J774A.1

小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞 K7M2WT (K7M2-wt)

小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 K7M2WT(K7M2-WT)-LUC

小鼠肺癌細(xì)胞 LLC

小鼠肺癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 LLC+LUC

小鼠淋巴瘤細(xì)胞 L5178Y TK+/- clone (3.7.2C)

小鼠成纖維細(xì)胞 L929

小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞 L Wnt-3A

小鼠乳腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞 MA-891

小鼠膀胱癌細(xì)胞 MB49

小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞 MC38

小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 MC38+LUC

小鼠胚胎成骨細(xì)胞 MC3T3-E1

小鼠顱頂前骨細(xì)胞亞克隆14 MC3T3-E1subclone 14

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 MEF

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 MEF(C處理)

小鼠前胃癌細(xì)胞 MFC

小鼠肺泡巨噬細(xì)胞 MH-S

小鼠胰島內(nèi)皮細(xì)胞 MS1

小鼠腎足細(xì)胞 MPC-5

小鼠正常肝細(xì)胞 NCTC1469（NCTC CLONE 1469）

小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞 neuro-2a

小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 neuro-2a+luc

小鼠胚胎細(xì)胞 NIH/3T3

小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞 OP9

小鼠雜交瘤（抗CD2）細(xì)胞 OKT11

小鼠畸胎瘤細(xì)胞 P19

小鼠淋巴樣瘤細(xì)胞 P388D1

小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞 P815

小鼠胰腺癌細(xì)胞 panc02

小鼠胰腺癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 panc02+LUC

小鼠源基于MLV-10A1逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞系 PT-67

小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞 RAW 264.7

小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞+GFP RAW 264.7+GFP

小鼠腎癌細(xì)胞 Renca

小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞 RGC-5

小鼠前列腺癌細(xì)胞 RM-1

小鼠前列腺癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 RM-1+LUC

小鼠雜交瘤 SDOW-17

小鼠骨髓瘤細(xì)胞 Sp2/0

小鼠骨髓瘤細(xì)胞 Sp2/0-Ag14

小鼠腎小球系膜細(xì)胞 SV40-MES-13

小鼠肺上皮細(xì)胞 TC-1

小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞 TM3

正常小鼠睪丸Sertoli細(xì)胞 TM4

小鼠子宮頸癌細(xì)胞 U14

小鼠淋巴瘤細(xì)胞 YAC-1

千舍重磅推出自有品牌胎牛血清WinSera胎牛血清：

產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)

1.獨(dú)立采血基地

·全程監(jiān)管原血的采集和處理過(guò)程，品質(zhì)可控。

·原血清采集過(guò)程中會(huì)對(duì)母牛和胎牛進(jìn)行統(tǒng)一編碼，每一個(gè)接血瓶、原血清的收集容器也進(jìn)行統(tǒng)一編碼，這些編碼會(huì)記錄在冊(cè)，提供了再檢驗(yàn)、加工和售前、售后的可追溯性。

2.完善的生產(chǎn)工藝

·選用天然牧場(chǎng)的健康孕牛，破腹取胎牛，采用全封閉心臟穿刺采血、快速低溫分離技術(shù)確保了原血清的品質(zhì)。

·采用進(jìn)口血清生產(chǎn)線(xiàn)，使用多級(jí)高置留膜過(guò)濾和3次0.1um終端微濾方法，杜絕了血清中的污染。

3.質(zhì)檢嚴(yán)格

·質(zhì)量檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)與國(guó)際接軌-產(chǎn)品按照《中國(guó)藥典》、《美國(guó)藥典》美國(guó)9CFR檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行54項(xiàng)指標(biāo)的檢測(cè)。